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微量分光光度計選購指南

[2011/8/31]

  自從03年Nanodrop推出首款超微量分光光度計,立即受到全球各分子生物學(xué)實驗室的一致追捧和好評。僅需0.5-1ul的樣品體積,對于分子生物學(xué)實驗來說,不僅意味著大大減少檢測損耗的樣品,也因為檢測光徑減小而減少了對高濃度樣品如核酸或蛋白進(jìn)行梯度稀釋的需求,實在太方便。

  近期的超微量分光光度計市場可真是熱鬧,各大品牌如NanoDrop、BioTek、島津等,都爭相推出了最新力作。讓人欣喜的是,我們還看到了可與大品牌媲美的國產(chǎn)分光光度計,這說明國內(nèi)的儀器市場也在不斷地創(chuàng)新。因此,如何選擇一臺合適的微量分光光度計顯的尤為重要。

  分光光度計作為實驗室中最常用的儀器之一,從低端到高端,五花八門,大家在選擇時可能有些無所適從。而只有從實驗室的實際需要出發(fā),才能挑選出最合適的儀器。

 、倌銈儗嶒炇业某R(guī)應(yīng)用有哪些?未來會增加或改變嗎?

 、谀阈枰獪y量的樣品體積范圍?如果它變化很大,你需要著重考慮分光光度計的樣品量和靈活性。

  ③你是否需要同時測量多個樣品?

 、苣阈枰裁礃拥撵`敏度?對于低濃度樣品,3-5 nm的帶寬比窄帶寬(1 nm)儀器的一致性更好。

 、萦卸嗌偃藭灿眠@一臺分光光度計?如果多人共用,預(yù)設(shè)程序可能會比較方便。

  有一些硬性指標(biāo),在選購時不得不看。分光光度計的波長范圍是選購時要考慮的重要因素之一。在生物學(xué)實驗中,一臺覆蓋紫外光和可見光的分光光度計是不可缺少的。

  分光光度計的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量。對于定量分析而言,3-5nm比較合適。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要,當(dāng)然,價格也更高。

  在檢測器方面,CCD陣列更為普及。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍,不僅光利用率得到改善,信噪比也得以提高。另外,CCD 陣列系統(tǒng)采用模塊化處理,使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管(PMTs)等單點(diǎn)真空管檢測器。

  樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿,動輒50 ul,對于珍貴樣品來說那可真是大出血。因此現(xiàn)在面向分子生物學(xué)的分光光度計都趨向于微量化了(揮發(fā)性樣品不宜)。近期推出的幾款分光光度計,都無需比色皿,將樣品滴在特殊的表面上即可測量,所需的樣品量在2 ul或以下。這種方法檢測范圍超寬,無需對樣品進(jìn)行稀釋。稀釋樣品不僅耽誤時間,在準(zhǔn)確性上也是大打折扣。

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