三點(diǎn)鑒定抗血清質(zhì)量

　　抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數(shù)主要有幾項(xiàng)：

　　1.親和性(affinity) 是指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強(qiáng)度，常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正/逆向反應(yīng)速度常數(shù)的比值，單位為稀釋度單位(L/mol或LM-1)，表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結(jié)合下降50%;而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)(Kd)，其單位為濃度單位(mol/L)。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，需選用Ka值高(109一1012L/mo1)的抗血清。

　　2.特異性(specificity) 是指一種抗體識(shí)別相應(yīng)抗原決定簇的能力。由于一種抗原常有結(jié)構(gòu)極相似的類似物(同類物、前體、降解物和代謝物)，其抗血清可能對(duì)該抗原的類似物產(chǎn)生交叉反 應(yīng)。因此，抗體的特異性通常以交叉反應(yīng)率表示：將反應(yīng)的最大結(jié)合率抑制下降50%時(shí)特異性抗原與類似物的劑量(ED50)之比來(lái)計(jì)算交叉反應(yīng)率。如胰島素標(biāo)準(zhǔn)品使125I胰島素與抗血清的最大結(jié)合下降50%的用量為0.5ng，而類似的物(前體)胰島素原的用量為500ng，則相應(yīng)的交叉反應(yīng)率(%)為：0.5/500=0.1%。

　　抗體交叉反應(yīng)程度的高低直接影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，但應(yīng)注意，抗血清特異性與分析方法特異性并不完全相同，因后者對(duì)某一待測(cè)抗原的特異性程度不僅取決于所用抗體，尚有賴于標(biāo)記物的質(zhì)量和方法學(xué)設(shè)計(jì)。

　　3.效價(jià)(titer) 是反映抗血清中有效抗體含量的相對(duì)參數(shù)，即抗血清稀釋至能與抗原發(fā)生有效反應(yīng)的最大稀釋度。通常是將一株抗血清作系列稀釋后與標(biāo)記抗原反應(yīng)，計(jì)算不同稀釋 度時(shí)抗體結(jié)合標(biāo)記抗原的百分率，繪制出抗體稀釋度曲線。結(jié)合具體方法設(shè)計(jì)要求。效價(jià)一般指結(jié)合50%標(biāo)記抗原時(shí)，抗血清的稀釋度。