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薄層層析分離中的點(diǎn)樣

[2014/2/19]

  薄層層析分離中的點(diǎn)樣是將經(jīng)離心機(jī)處理后的樣品點(diǎn)在薄層的特定部位,點(diǎn)樣的好壞直接影響分離效果。點(diǎn)樣可用玻璃毛細(xì)管或微量移液管等。

  一、點(diǎn)樣位置:

  1、上行展開法點(diǎn)樣一般在距薄層下端4~5cm處。

  2、下行展開法點(diǎn)樣一般在距薄層上端6~8cm處。

  3、雙向展開法點(diǎn)樣處應(yīng)位于距薄層右側(cè)邊5cm與距底邊5cm直線的交點(diǎn)。

  二、點(diǎn)樣注意事項(xiàng):

  1、樣品最好用具有揮發(fā)性的有機(jī)溶劑溶解,不應(yīng)用水溶液,因?yàn)樗肿优c吸附劑的相互作用力較弱,當(dāng)水分子占據(jù)了吸附劑表面的活性位置時(shí),會(huì)使吸附劑的活性降低,而使斑點(diǎn)擴(kuò)散。

  2、點(diǎn)樣量不宜太多,否則會(huì)降低遷移率,一般為幾到幾十微克。

  3、原點(diǎn)直徑要控制在2mm以內(nèi)。為此須分次點(diǎn)樣,邊點(diǎn)樣邊用冷、熱風(fēng)交替吹干。

  4、薄層板在空氣中不能放置太久,否則會(huì)因吸潮而降低活性。

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