運(yùn)用流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)細(xì)胞應(yīng)注意的問題

　　制作組織勻漿或細(xì)胞懸液，用熒光染料染色，則可以用流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)不同DNA含量或倍數(shù)的細(xì)胞數(shù)。例如，在睪丸組織中，精子細(xì)胞為單倍體細(xì)胞，精原細(xì)胞、 Sertoli細(xì)胞、Leydig細(xì)胞和其他非生精細(xì)胞為雙倍體細(xì)胞，初級(jí)精母細(xì)胞以及處于分裂期的精原細(xì)胞和非生精細(xì)胞為四倍體細(xì)胞。因此，運(yùn)用流式細(xì)胞儀測(cè)定睪丸組織各級(jí)生精細(xì)胞DNA倍體的變化，可以間接判斷不同生精細(xì)胞數(shù)目相對(duì)比例變化的趨勢(shì)。但是，利用這些結(jié)果得出結(jié)論時(shí)一定要謹(jǐn)慎。例如，單倍體細(xì)胞數(shù)所占百分比下降可能說明精子細(xì)胞數(shù)量減少，但以下三種情況也可能引起百分比下降：

　　一是單倍體細(xì)胞數(shù)不變，其他倍體細(xì)胞數(shù)增加;

　　二是單倍體細(xì)胞數(shù)增加，其他倍體細(xì)胞數(shù)也增加而且增加得相對(duì)較多;

　　三是單倍體細(xì)胞數(shù)減少，其他倍體細(xì)胞數(shù)也減少，只是減少得相對(duì)較少。

　　與此類似，該百分比不變可能說明精子發(fā)生未受到影響，但以下兩種情況也可能出現(xiàn)此種結(jié)果：?jiǎn)伪扼w細(xì)胞和其他倍體細(xì)胞成比例地增加;單倍體細(xì)胞和其他倍體細(xì)胞 成比例地減少。因此，姑且不論細(xì)胞的準(zhǔn)確辨認(rèn)以及組織勻漿過程中細(xì)胞粉碎等問題，流式細(xì)胞儀估計(jì)細(xì)胞數(shù)至少存在這樣一個(gè)缺陷：一般只能反映細(xì)胞的相對(duì)數(shù)目比，而不能確定測(cè)定的細(xì)胞在某感興趣區(qū)域內(nèi)的總數(shù)目是否真的有所增加、減少或不變。